Legislazione sulle micotossine

Le micotossine, se ingerite attraverso alimenti contaminati, causano nell’uomo e negli animali effetti tossici di natura ed entità variabili a seconda della modalità, della dose e della frequenza di esposizione. La Commissione Europea ha emanato una serie di regolamenti e raccomandazioni che indicano quali sono i limiti massimi consentiti per le micotossine nei diversi cereali, facendo distinzione in base alla destinazione d’uso. Un regolamento è un atto legislativo vincolante e deve essere applicato in tutti i suoi elementi nell'intera Unione Europea. Una raccomandazione non è invece vincolante; consente alle istituzioni europee di rendere note le loro posizioni e di suggerire linee di azione senza imporre obblighi giuridici a carico dei destinatari.

La Raccomandazione (CE) n. 576-2006 suggerisce i limiti di Fusarium-tossine (fumonisine, DON e ZEA) e ocratossina A in prodotti destinati all’alimentazione animale distinguendo tra materie prime e mangimi complementari e completi. Il Regolamento (CE) N. 1126-2007 sancisce invece i limiti per le Fusarium-tossine in prodotti per l’alimentazione umana, distinguendo tra cereali non trasformati e prodotti finiti derivati dai cereali. Una particolare attenzione, con limiti notevolmente inferiori, è posta agli alimenti a base di cereali per lattanti e bambini (Tabella 1).

 Tabella 1. Limiti, espressi in μg/kg, stabiliti le Fusarium-tossine e ocratossina A.

Per quanto riguarda le aflatossine, in Tabella 2 sono sintetizzati i limiti stabiliti per diversi tipi di materie prime destinate all’alimentazione umana e animale (Regolamento CE N. 0574-2011). I limiti ammessi sono piuttosto bassi, a causa dell’elevata tossicità di queste sostanze.

Tabella 2. Limiti stabiliti per l’aflatossina B1, espressi in μg/kg. 

Infine, la Raccomandazione (CE) N. 165-2013 stabilisce i limiti della presenza di tossine T2 e HT2 in alimenti e mangimi (Tabella 3).

Tabella 3. Limiti stabiliti per T2 + HT2 (μg/kg).

Monitoraggio delle micotossine

Negli ultimi dieci anni sono stati finanziati a livello nazionale o regionale diversi progetti di ricerca finalizzati al monitoraggio delle principali colture cerealicole italiane. Un esempio è il progetto Micoprincem, finanziato dal Mipaaf nel triennio 2011-2013, che ha consentito il monitoraggio delle colture di mais (fumonisine, aflatossine e DON), frumento duro, frumento tenero e orzo (DON e tossine T2/HT2). Le attività previste consistevano nell’analisi di campioni provenienti da un certo numero di centri di stoccaggio sparsi sul territorio per stabilire i livelli di contaminazione delle produzioni cerealicole.

Nell’ambito del monitoraggio, un’attenzione particolare deve essere posta al processo di campionamento: tanto più il campione da sottoporre all’analisi è rappresentativo dell’intera partita, tanto più il risultato analitico rappresenterà il dato effettivo di contaminazione. Pertanto, i campioni vengono di solito ottenuti con metodi di campionamento dinamico: da prodotto in movimento (durante le operazioni di carico degli autotreni in uscita o in occasione delle movimentazioni interne) viene derivato un campione globale di circa 8-20 kg da cui, con metodi di sample sorting, (es. quartatura) si ottiene un campione di 1,5-2 kg per il laboratorio di analisi.

Metodi di analisi

L’azione delle micotossine si manifesta spesso anche quando sono presenti in piccole quantità (ppb o μg/kg); per questo motivo i metodi di analisi usati per il monitoraggio devono essere molto sensibili. I metodi più affidabili sono la gas cromatografia (GC), la cromatografia liquida ad alta pressione (HPLC, Figura 1) e la cromatografia liquida abbinata alla spettrometria di massa (LC-MS).

figura 1 - HPLC

Strumentazione per analisi HPLC e cromatogramma con le fumonisine presenti in un campione di mais (da: Seo e Lee, Appl. Environ. Microbiol. 1999, 65(3):1331).

 D’altra parte, per avere dei risultati in tempi più veloci, che consentano di decidere rapidamente la destinazione d’uso di un materiale, il contenuto di micotossine può essere determinato mediante metodi immunoenzimatici (ELISA, Figura 2). Questi metodi sono meno sensibili rispetto alla cromatografia, ma consentono di ottenere un risultato affidabile; vengono usati soprattutto quando il numero di campioni da analizzare è elevato.

figura 2 - Analizzatore Chemwell®

Analizzatore Chemwell® per la determinazione del contenuto in micotossine mediante metodo ELISA.
 

Alcuni risultati del monitoraggio

Per quanto riguarda il monitoraggio del mais, nel triennio 2011-2013 il livello delle fumonisine è andato progressivamente aumentando. Nel 2011 i campioni con contaminazione sopra il limite di 4000 µg/kg rappresentavano l’11% del totale, nel 2012 il 52% e nel 2013 il 62%. Il monitoraggio sulla contaminazione di aflatossina B1 ha rivelato che il 23% dei campioni analizzati superava la soglia stabilita dalla legge nel 2012, mentre solo il 5% nel 2013. La stagione agronomica 2012 infatti, come nel 2003, è stata caratterizzata da temperature elevate e scarsa piovosità, condizioni che hanno favorito la diffusione del fungo Aspergillus. La contaminazione di DON invece non ha raggiunto livelli preoccupanti (6% dei campioni analizzati nel 2013 sopra i limiti).

 Il monitoraggio di frumento tenero ha mostrato nel triennio 2011-2013 contaminazioni di DON localizzate quasi esclusivamente nell’areale Nord Italia, in particolare Piemonte e Lombardia, con un numero di campioni sopra i livelli allarmanti più alto nel 2013. Le contaminazione di tossine T2/HT2 è stata limitata. L’annata peggiore è stata quella del 2011, con il 16% dei campioni sopra la soglia limite; negli anni 2012-2013 la quasi totalità dei campioni ha presentato valori inferiori al limite di rilevabilità del metodo. In generale, al contrario della contaminazione da DON, queste tossine sono state rilevate maggiormente negli areali Centro e Sud Italia.

Il monitoraggio di frumento duro, come quello del frumento tenero, ha mostrato un’incidenza di DON più accentuata nel Nord e Centro Italia e un’incidenza di tossine T2/HT2 più marcata al Sud. I dati ottenuti sembrano confermare un diverso quadro sia di diffusione che di entità di contaminazione di ciascuna delle micotossine considerate, con una diversificazione della loro presenza nel frumento duro negli areali considerati. Ciò permette di ipotizzare un diverso adattamento/competizione dei fughi produttori in ogni areale di coltivazione.

Infine il monitoraggio della filiera dell’ orzo da malto, destinato all’alimentazione umana, ha mostrato trascurabili livelli di contaminazione da DON in tutti i campioni del triennio. Al contrario, il monitoraggio di T2/HT2 ha evidenziato la presenza di alcuni “hot spot” di contaminazione, correlabili a specifiche zone territoriali, pratiche agronomiche e all’andamento delle precipitazioni.